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엔도톡신(Endotoxin)은 그람 음성균(Gram Negative Bacteria)의 지질다당류(LPS)에서 유래한 물질로써 내독소라고도 합니다. 엔도톡신은 열 및 pH에 안정적이어서 여러가지 멸균방법으로도 제거가 어렵습니다. 엔도톡신이 체내에 들어가게 되면 발열,쇼크 및 심지어는 사망에 까지 이를 수 있습니다. 이에 따라서 의약품 및 의료기기를 출하하기 전에 엔도톡신 테스트를 하는 것이 중요합니다.
엔도톡신 검사란 투구게(Limulus polyphemus)의 혈액세포(amebocytes)의 수용성 추출물(Lysate)을 동결건조하여 생산하는 시약과 미지의 샘플을 혼합하여 분석방법인 LAL 테스트 방법이 있읍니다. LAL 테스트 방법에는 응고법(Gel-Clot),탁도법(Tubidimetrics) 및 비색법(Chromogentics)이 있으며 미지의 용액내에 엔도톡신 유무를 정성적으로 또는 정량적으로 검사하는 방법입니다. 대장균(E-coli)을 이용하여 투구게의 수용성 추출물(Lysate)을 인공적으로 생산하여 만든 유전자재조합 시약(Recombinant Reagent) 있으며 비색법을 이용하여 정량적으로 검사하는 방법이 있습니다. 엔도톡신과 시약간의 메커니즘은 아래와 같습니다.
동물유래 엔도톡신 시약에 대체 시약인 유전자 재조합 시약에 대한 국제적 규정은 빠르게 정립되고 있습니다. 유전자 재조합시약은 다양한 국가에서 대체시험법 및 일반시험법으로 약전에 등재되어 있으며 점차 일반시험법으로 변경되는 추세입니다. 유전자 재조합 Factor C 시약은 가장 먼저 한국,미국,유럽,중국,일본,인디아 및 중앙아시아의 약전에 일반실험법과 대체실험법으로 등재되었습니다.
LAL 테스트와 동일하게 시약,CSE,형광기질 및 분석버퍼로 구성되어 있으며 대량 샘플 테스트에 적합
필요한 표준곡선(SC) 및 양성 제품 대조군(PPC)이 사전 코팅된 96웰을 사용하며 대량샘플 및 편리성에 적합
필요한 표준곡선(SC) 및 양성 제품 대조군(PPC)이 사전 코팅된 Strip을 사용하며 소량샘플 및 편리성에 적합
엔도톡신 결합을 위한 파지 단백질로 사전 코팅된 마이크로플레이트를 사용하며 복잡한 샘플에 적합
6- 384 마이크로 플레이트을 형광법으로 유전자 재조합 시약을 이용하여 엔도톡신를 측정하는 장비
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